薄層色譜的使用方法產品說明 薄層色譜使用方法
時間:2023-01-09 09:30:01 作者:河北航信儀器 點擊:
【*** 使用手冊】薄層色譜掃描儀是可以對斑點進行掃描的分光光度計,通常用可見光或紫外光作光源,線性掃描或鋸齒掃描薄層板展開后的斑點,該斑點就吸收該組分特征波長的單色光,剩余的單色光經透射或反射或發射熒光,由檢測器積分起來獲得這塊斑點面積的待測物質含量。儀器適用于化工、醫藥、臨床、農業、食品、毒理等領域的各種化合物的分離、精制、定性鑒別、雜質檢查和含量測定。 操作方法: 1、薄層板制備:除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2~0.3mm)取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。 2、點樣:除另有規定外,用點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況應以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。 3、展開展開缸如需預先用展開劑飽和,可在缸中加入足夠量的展開劑,并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封缸頂的蓋,使系統平衡或按正文規定操作。將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5-1.0cm密封缸蓋,待展開至規定距離取出薄層板,晾干后按各品種項下的規定檢測。 4、如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法,除規定外可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明, 結合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結果的因素很多,故應在保證供試品的斑點在**濃度范圍內呈線性的情況下,將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描,進行比較并計算定量,以減少誤差。各種供試品,只有得到分離度和重現性好的薄層色譜,才能獲得準確的結果。
薄層色譜儀的適用
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜;
它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大;
因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。
此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;
涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內,浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時;
將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。
是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。
一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;
另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。
因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發性較小或在較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物資。
此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。