【***** 使用手冊】選擇一臺好的液相色譜儀對企業(yè)、實驗室的生產工作有很大的幫助，那么選擇一臺好的液相色譜儀該注意哪些因素呢？首先是看指標，而液相色譜儀的指標很多，有泵的、檢測器的、色譜柱等等；然后就是國家標準，儀器的主要指標有噪音，漂移，zui小檢測濃度，定性定量重復性等，筆者將從這兩個方面一一為讀者朋友們分析。　　1、噪音　　噪音的大小直接關系到儀器的檢測靈敏度，噪音越大，檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好，否則噪音過大將會導致基線不穩(wěn)，甚至影響分析結果。　　2、漂移　　漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內基線漂離原點的距離，通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質的儀器能在較短的時間內達到穩(wěn)定，從而在**程度上提高了分析效率。　　3、色譜柱　　色譜柱是液相色譜儀的心臟，通常要求柱效高、選擇性好，分析速度快等。目前市場上銷售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、氧化鋁、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。　　4、進樣器　　進樣裝置要求：密封性好，重復性好，死體積小，保證**進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。而且進樣方式多種多樣，可分為隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。自動進樣器則是市場發(fā)展的趨勢。　　5、數據處理系統(tǒng)　　一般專業(yè)的液相色譜儀生產廠家都有自己配套的液相色譜儀控制軟件，但有不少液相色譜儀可以使用通用型的色譜數據工作站進行數據計算處理，在數據處理系統(tǒng)方面需根據自身資金來調整。　　6、操作簡便　　操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的，操作越簡單不僅用戶上手更快，也有利于提高分析效率，也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助。　　目前**外都有著比較知名的液相色譜儀生產銷售企業(yè)，只要把握了以上幾點，并選擇較為知名的液相色譜儀生產銷售企業(yè)，相信讀者朋友們都能夠選購到心儀的液相色譜儀器。 反相**液相色譜柱的維護如何？

反相**液相色譜柱是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，**一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高。

在**液相色譜中這是應用面較廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色譜條件下，流動相多采用酸性的、低離子強度的水溶液，并加**比例的能與水互溶的異丙醇、乙腈或甲醇等有機改性劑，大量使用的填料為孔徑在30納米以上的硅膠烷基鍵合相，除此之外，也有少量高聚物微球。

反相**液相色譜柱的使用和維護

在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。

(1)柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產生空隙。

(2)如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。

(3)避免壓力和溫度的急劇變化及**機械震動。

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。

(4)應逐

漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)?*是水，反之亦然。

(5)如使用柱溫控制裝置時，應注意在通人流動相后才能升溫。

(6)一般說來反相**液相色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。

(7)選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。

(8)避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。

(9)經常用強溶劑沖洗色譜柱，**保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。

(10)保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。**禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。

(11)反相**液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進人柱內，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

(12)在完成分離分析工作之后，不應立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內的雜質。

在日常分離分析工作中，反相**液相色譜柱的正確使用和維護**重要，色譜柱使用是否得當，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。