色譜柱日常維護
    每天用足夠的時間來維護色譜柱，您將節省更多有利于處理色譜柱故障的時間，調試您的色譜柱的壽命也會變得更長，色譜柱的使用壽命，除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關，***主要的是與日常維護密切相關。色譜柱的使用壽命主要根據柱效和柱壓兩個指標來衡量，如果一支色譜柱的柱效太低或者太高，通常被認為該色譜柱的使用壽命已盡結束。因此，延長色譜柱的使用壽命關鍵是，**引起柱效下降和柱壓升高的因素，通過以下幾點幫戰您完成色譜柱的日常維護工作。
   一、流動相的pH應在使用范圍內
以硅膠為基質的反相色譜柱的pH范圍為2~9，流動相超過其pH范圍將會導致硅膠基質流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降，壽命變短。

   二、去除樣品和流動相匯總的固體顆粒
樣品和流動相中含有固體顆粒物質會堵塞色譜柱篩板，不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降。因此，建議使用超純水和色譜純試劑，在分析前對樣品進行針筒過濾，流動相過0.45um濾膜。

   三、使用保護柱或在線過濾器
保護柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質到達色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此除對樣品和流動相進行過濾外，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。

   四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽使用不當會使其在流動相（含有機溶劑）中析出，堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結，柱壓上升；同時阻礙了基質上的鍵合的碳鏈自由舒展，使用色譜柱的保留能力下降，柱效降低。

   建議使用前要過濾，使用后要沖洗。具體方法如下：
  1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需要過濾流動相1.0ml/min流速沖洗60min.
  2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前，用與初始流動相組成相同的過濾流動相似1.0ml/min流速沖洗60min；分析完成后，再用該過濾流動以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設定應盡量平緩，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。

  五、柱清洗方法：
  1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。
  2、使用過緩沖鹽：分析完成后，先后用上述方法除去緩沖鹽，然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱60min。

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    凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術，由于設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果。

    凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜主要用于高聚物的相對分子質量分級分析以及相對分子質量分布測試。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規模地用于工業生產。

    那么，凝膠色譜柱應該如何進行清洗和存放呢？

    1.色譜柱的清洗。

    為了不使被測物質和雜質停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應及時地清洗色譜柱。首先要用對被測樣品洗脫能力強的溶劑來洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其先流出的物質是極性大的物質，此時應用**的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內的極性小的物質洗脫下來，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。如果流動相是緩沖溶液，則應先用蒸餾水來沖洗色譜柱，以沖掉柱內的鹽，然后再用合適的溶劑來沖洗。

    2.色譜柱的存放。

    如果色譜柱暫時不用，存放時要注意以下幾點：

    a.幾天之內的短期放置，凝膠柱則用蒸餾水來沖洗，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。

    b.如果色譜柱長期不用，僅用上述方法來處理就不行了，這時應使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱，凝膠柱則不能用水了，因柱內如果有微生物的生長則會使柱效降低，此時應用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴。色譜柱長期放置時，**要將色譜柱的兩端封嚴，以防止由于溶劑揮發而造成的柱填料干縮現象，因這可導致柱效的嚴重降低。

    c.色譜柱應貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環境里，柱內就會結冰，這也將導致柱效的降低。

色譜柱壓力過高或低的原因

　　色譜柱是**液相的心臟，在液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命是非常重要。色譜柱壓力過高、過低都屬于柱壓問題。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質，造成流體阻力加大所致。下面大致總結為以下幾個方面：　　1、流動相的前處理：　　流動相或楊平中雜質堵塞色譜柱進口濾片，導致壓力升高。這是由于流動相可能沒有過濾，或過濾不**，使固體雜質滯留于濾板上所致。另一個方面也可能沒有使用預保護柱所致。　　2、樣品的沉淀：　　當流動相與溶解樣品的溶劑不一致時，樣品進入色譜柱時，可能因溶解度降低而沉淀出來吸附于柱內，造成壓力升高。　　3、晶體的析出：　　使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出阻塞而壓力升高。　　4、**或霉菌滋生：　　流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長霉菌堵塞濾板，導致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現配現用。　　5、溶質吸附：　　一些溶質在色譜柱上有較強大的吸附力，洗脫時流動相也難以**掉，累積的未洗脫溶質也會造成阻力增大從而造成壓力升高。　　6、流動相更換過度較快：　　當改變流動相體系時，不**的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。　　7、壓力脈沖：　　運行過程中，有時會產生整個液相色譜儀系統內壓力的突然升降。如泵壓力變化，此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。