液相色譜柱是液相色譜的核心部件，它主要起到了分離作用。色譜柱同樣也是一個消耗品，在流動相沖刷的過程和樣品在分析的過程，填料損失和污染使得色譜柱的性能慢慢下降。所以，對于液相色譜尤其是常用的C18柱，需要在**時間內對其性能做一個評估，同樣，新的色譜柱也要對色譜柱做一個有效的體檢。

　　液相色譜柱的十大常見故障：

　　1、若操作過程發現壓力很小，則可能管件連接有漏，注意檢查。當出現錯誤警告(各組件指示燈均為紅色)，一般為漏液，其中一個感應器中已有溶劑，漏液故障排除后，擦干，點擊On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再點擊操作界面中的Instrument/System On即可。

　　2、連接柱子與管線時，應注意擰緊螺絲的力度，過度用力可導致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發生漏液，可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠家的管線及色譜柱頭結構有差異，不要混用，必要時可使用PEEK管及活動接頭;

　　3、操作過程若發現壓力非常高，則可能管路已堵，應先卸下色譜柱，然后用分段排除法檢查，確定何處堵塞后解決。若是保護柱或色譜柱堵塞，可用小流量流動相或以小流量異丙醇沖洗，還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡)，若還是無法通暢，則需換柱;

　　4、運行過程中自動停泵，可能為壓力超過上限或流動相用完;

　　5、樣品瓶中樣品較少，自動進樣器進樣針無法到達液面，可采用調低進樣針進樣高度的辦法，注意設置時不要使進樣針碰到瓶底，微量樣品分析應使用微量樣品瓶;

　　6、自動進樣器進樣針未與樣品瓶瓶口對準時，需重新定位。

　　7、泵壓不穩或流量不準，可能為柱塞桿密封圈問題或seal wash墊圈問題，需更換;

　　8、基線產生不規則噪聲，可能原因為系統不穩定或沒達到化學平衡(使其平衡，若用離子對試劑，在使用使需要足夠的時間和溶劑體積，色譜柱才能達到足夠的平衡)，流動相被污染(更換流動相，清洗儲液器、過濾器，沖洗并重新平衡系統)，色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱)，檢測器不穩定;

　　9、短期有規則的噪聲，可能原因為泵壓不穩或泵脈沖，調節溶劑不適當(如兩種溶劑的互溶性問題)，泵入口管路松或堵塞，泵太臟，泵柱塞磨損，檢測器不穩定;

　　10、長期有規則噪聲，可能原因為室溫不穩(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當;

在液相色譜操作過程中，我們需要下面的問題，方便維護液相色譜柱。 A柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產生空隙。 B.如果儀器用來做常規分析，樣品種類有限，但分析次數多，則不妨為每一類常規分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。 C.避免壓力和溫度的急劇變化及**機械震動。溫度的突然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。 D.應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變為**是水，反之亦然。 E.如使用柱溫控制裝置時，應注意在通人流動相后才能升溫。 F.一般說來液相色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。 G.選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。 H.避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。 I.經常用強溶劑沖洗液相色譜柱，**保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50-75mL。 J.保存液相色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發干燥。**禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。 K.液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進人柱內，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。 L.在完成分離分析工作之后，不能馬上就關機，需及時對色譜分析系統進行沖洗，一般0.5h以上，以除去液相色譜柱內的雜質。