安捷倫液相色譜儀的規范操作　　1. 目的：明確安捷倫液相色譜儀的規范操作，確保數據的準確性。　　2. 范圍：適用于安捷倫液相色譜儀。　　3.職責：檢驗人員對此負責。　　4.操作規程：　　4.1系統組成　　本系統由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學工作站和電腦等組成。　　4.2安捷倫液相色譜儀準備　　4.2.1使用前應根據待檢樣品的檢驗方法準備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。　　4.2.2 根據待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進出口位置應與流動相流向一致)和定量環。　　4.2.3 配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統時配制)，用合適的0.45μm濾膜過濾。　　4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常　　4.1 將待測樣品按要求前處理，準備HPLC 所需流動相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等。　　4.3安捷倫液相色譜儀開機：　　4.3.1 打開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運行CAG Bootp Server程序。　　4.3.2打開 1200 LC 各模塊電源。　　4.3.3 待各模塊自檢完成后，雙擊[Instrument 1 Online]圖標，化學工作站自動與1200LC　　通訊，進入的工作站畫面如下所示。　　4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運行控制]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄]， [ 顯示狀態工具欄]，[系統視圖],[樣品視圖]，使其命令前有[√]標志，來調用所需的界面。　　4.3.5把流動相放入溶劑瓶中。　　4.3.6打開沖洗閥。　　4.3.7點擊[泵]圖標，點擊[設置泵…]選項，進入泵編輯畫面。　　4.3.8設流速：5ml/min，點擊[確定]。　　4.3.9 點擊[泵] 圖標，點擊[控制…]選項，選中[啟動]，點擊[確定] ，則系統開始沖洗，直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止。　　4.3.10 點擊[泵] 圖標，點擊[控制…]選項，選中[關閉]，點擊[確定]關泵， 關閉沖洗閥。　　4.3.11 點擊[泵]圖標，點擊 [設置泵…選項]，設流速：1.0ml/min。　　4.3.12 點擊泵下面的瓶圖標，如下圖所示(以單元泵為例)，輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積，點擊[確定]。　　4.4安捷倫液相色譜儀的數據采集方法編輯　　4.4.1開始編輯完整方法：從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項，如下圖所示選中除[數據分析 ]外的三項，點擊[確定]，進入下一畫面。 4.4.2方法信息　　4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如：測試方法)。 4.4.2.2 點擊 [確定]， 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數設定　　4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min，在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓，以保護柱子。　　4.4.3.2 點擊[確定]，進入下一畫面。　　4.4.4柱溫箱參數設定　　4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內輸入所需溫度,如：40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側相同]，使柱溫箱的溫度左右一致。　　4.4.4.2點擊[確定]，進入下一畫面。　　4.4.5 檢測器參數設定：檢測波長：一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬：一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域 。參比帶寬：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈。　　4.4.6在[ 運行時選項表 ]中選中[ 數據采集]，點擊[確定]。　　4.4.7 點擊[方法]菜單，選中[方法另存為…]，輸入一方法名，如[測試]，點擊[確定]。　　4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復10,選中[信號窗口2]。　　單擊[改變]鍵，即可彈出右側的[編輯信號圖譜]窗口，進而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項，如下圖所示，輸入操作者名稱，如[安裝工程師]；在[數據文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數器]。區別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數據覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數器----[前綴]框中輸入前綴，在[計數器]框中輸入計數器的起始位，儀器會自動命名，如vwd數據0001，vwd數據0002……。　　4.4.10 點擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統開啟]。　　4.4.11 等儀器準備好，基線平穩，用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。　　4.5安捷倫液相色譜儀的數據分析方法編輯:　　4.5.1 從[視圖]菜單中，點擊[數據分析]進入數據分析畫面。　　4.5.2 從[文件]菜單選擇[調用信號]，選中您的數據文件名，如下圖所示。點擊[ 確定]，則數據被調出。　　4.5.3做譜圖優化：從[圖形]菜單中選擇[信號選項]，如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿量程] 或[自動量程] 及合適的時間范圍或選擇[自定義量程] 調整。反復進行，直到圖的比例合適為止。點擊[ 確定]。　　4.6安捷倫液相色譜儀積分:　　4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項，如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度]　　，[峰寬]，[zui小峰面積]，[zui小峰高]。 **液相色譜分析中基線很粗的話要考慮的方面 　　**液相色譜分析中基線很粗的話，需要考慮的方面較多，主要如下：

　　1、首先檢查**液相色譜儀的噪聲，如果噪聲大，會引起基線變粗，需要采取措施降低噪聲；如果基線粗是因為噪聲大引起，要解決這個問題就要看你的檢測器和工作站的指標以及壓力是否平穩，然后可以通過脫氣等一系列的方法降低噪聲。

　　2、調節你的電腦分辨率，如果分辨率太低，調節一下就會見效。

　　3、還可能是采樣頻率高。將檢測器的狹縫寬度設置得小一點，可能很快就能解決問題。

　　4、如果是工作站得坐標太大，調節一下，將坐標設置小點就可能解決問題。

　　5、有可能是光源用久了，能量不足引起，這樣的話應該調換光源。

　　6、電源的紋波太大，也會引起基線變粗，這個問題很多科技工作者不大注意沒，所以還應該仔細檢查光源的電路。

　　7、光路通道有污染或流動池污染。如果這樣，就要清洗光路通道中的光學組件，或者清洗流動池。

　　8、可流動相中有氣泡，應認真排氣。

　　9、如果確定不是色譜系統的原因，就可能是電源接地的問題，將檢測器外殼、接收裝置外殼和電腦的外殼等用電線連起來，認真的接地。