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液相色譜常見符號與術語歸納 液相色譜使用方法

時間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點擊:

  【***** 使用手冊】在液相色譜的相關運用和了解過程中,難免會出現一些不容易看懂的縮寫字符,如果不能了解這些字符所對應的意義和背后的含義,那么便不能更加有效率的使用和學習液相色譜儀的相關知識,下面便是總結的一些在液相色譜儀中常用的符號和術語(以字母順序排列):  ACN 乙腈 Acetonitrile   AUFS滿量程的吸光度單位Absorbance units, full scale   As 峰不對稱因子   B 二元流動相中的強溶劑;例如:反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇   BSA 牛血清白蛋白(一種蛋白質) Bovine serum albumin   CAF 咖啡因(中性溶質)   Caffeine CRF 色譜響應因子 Chromatographic response function;色譜圖總分離度的定量指標   dc 色譜柱內徑(cm)   DMOA 二甲基辛胺 Dimethyloctylamine   DNB 2,4-二硝基甲酰(基) 2,4-Dinitrobenzoyl   dp 色譜柱填料的粒度(cm)   DRYLAB 液相資源公司(LC Resources INC.)的計算機模擬軟件。DRYLAB I用于等度預測,DRYLAB G用于梯度預測 F 流動相的流速(ml/min)   FC-113 1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷   GPC 凝膠滲透色譜法 Gel-permeation chromatography   HA 酸性溶質,能電離出A-   Hex 己烷 Hexane   Hr 二相鄰譜帶之間的谷高   HVA 高香草酸 Homovanillic acid   h’ 峰高   h1,h2 相鄰譜峰1和譜峰2的峰高   IEC 離子交換色譜法 Ion-exchange chromatography   IP 離子對 Ion-pair   IPC 離子對色譜法 Ion-pair chromatography   J 色譜峰強度參數   K’所給譜峰的容量因子,k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0,tR=t0(1+k’)   k 梯度洗脫過程中,某溶質的k’的平均值或有效值   kw 以水做流動相k’的外推值   k1,k2 相鄰譜峰1和譜峰2的容量因子   L 色譜柱長度(cm)   Lc 檢測器流動池光路的長度(cm)   M 溶質的分子量   MC 二氯甲烷 Methylene chloride   MDST 混合設計統計技術 Mixture-design statistical technique;一種優化流動相的軟件  MeOH 甲醇 Methanol   MTBE 甲基叔丁醚 Methyl-t-butyl ether   MW 溶質的分子量   N 色譜柱塔板數   NAPA N-乙酰普魯卡因胺 N-Acetylprocainamide(堿性溶質)   N0 檢測器的基線噪音   ODS 十八烷基硅烷 Octadecylsilyl   P 色譜柱的壓力降[通常以巴(bar)表示,也用psi;另外,也用作柱極性參數  PA 普魯卡因胺 Procainamide(堿性物質)  PAH 聚芳香烴 Polyaromatic Hydrocarbon   PESOS 優化流動相的計算機軟件(美國Perkin-Elmer產品)   pKa 溶質酸性常數的負對數;當pH=pKa時,溶質中有一半是電離的   Rk 保留值范圍,Rk=(末譜峰k’)/(初譜峰k’)   RRM 相對分離度圖(通常N=10000)  Rs 相鄰二譜峰的分離度   S 當流動相中的%B改變時,測量溶質保留值的變化速率的參數   SAL 水楊酸 Salicylic Acid   SEC 尺寸排阻色譜法 Size-exclusion chromatography   S/N 信噪比 Signal to noise ratio   t 分離時間(min)(樣品進樣時t=0)   tp 梯度系統的滯后時間(min)   TBA 四丁基銨離子 Tetrabutylammonium ion   TEA 三乙胺 Triethylamine   THF 四氫呋喃 Tetrahydrofuran   tk 在用于校正等度洗脫溶劑強度的流動相離開梯度混合器時,梯度洗脫的時間TLC 薄層色譜法 Thin-layer chromatography   TMA 四甲基銨 Tetramethylammonium(鹽)   TMS 三甲基硅烷 Trimethylsilyl   tO 色譜柱的死時間(min)   tR 溶質的保留時間(min)   tG 梯度時間(min),即梯度開始至結束的時間 t1,t2 相鄰譜峰1和譜峰2的保留時間(min   ti 色譜圖中峰的保留時間(min)   tf 色譜圖中末峰的保留時間(min)   △tg tf-ti tx (tf-ti)/2   UV 紫外光   Vm 色譜柱的死體積(mL),Vm=t0F   VMA 香草扁桃酸 Vanillymandelic acid   wm 化合物的進樣量   w1,w2 相鄰譜峰1和譜峰2于半峰高處(W1/2)的寬度(min)  W1,W2 相鄰譜峰1和譜峰2的基線寬度(min)   W1/2 半峰高處的譜帶寬度   以上是常見的在液相色譜儀中出現的符號和術語歸納,受限于時間和精力,本文歸納僅為不**匯總,疏漏之處,歡迎補充。 液相色譜流動相說明

  流動相相當于液相的血液,可以想象對液相的重要程度。那么流動相都需要注意什么呢?  01、過濾溶劑  溶劑在使用前**要用0.5μm的過濾器過濾,如果使用固體化學試劑(緩沖鹽)配制流動相,過濾特別重要,不能讓固體微粒污染泵,阻塞進樣器和柱頭過濾片。本實驗室有水溶性和脂溶性兩種過濾膜供選擇(反光面朝上),過濾水溶性流動相時(如甲醇/水),先用1~2mL甲醇潤濕過濾膜,有助于快速抽濾。  02、保持儲液瓶的清潔  用普通溶劑瓶作流動相儲液器應不定期廢棄瓶子,***后一次應用HPLC級的水或溶劑清洗,不能在清洗過程中留下污跡。  03、保證溶劑的質量  **要用HPLC級的溶劑,水也應達到HPLC級,同樣也要使用高純度的緩沖鹽?! ∫恍┮蛄鲃酉嘁鸬某R妴栴}  01、流動相脫氣不充分  流動相受熱,或者流動相不同組分混合時會有氣體產生,氣泡進入泵內引起壓力波動,增加噪音,色譜圖上出現毛刺。可試用下列方法解決問題:流動相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用;改系統內混合為系統外預混合?! ?2、流動相供給不暢  流動相用完,管道中吸入氣體引起泵壓力不穩。應經常觀察儲液器中流動相的量,加足流動相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底,儲液器蓋上留一小孔正好夾住進液管,使其不能上下移動?! ∵^濾器阻塞引起管道和泵腔空化,壓力不穩。過濾器被微粒所阻塞或長霉,去掉過濾器后如果系統運轉正常,說明已找出問題,換上新的過濾器則可。有時候換上新的過濾器仍然不暢,那就需要查查流動相的制備過程,或者換大孔徑的過濾器。不管如何,流動相都需要重新過濾?! ×魉龠^高、阻力大,造成空化現象,這是由于過濾器孔徑、管道內徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min,常會出現這種現象?! ∈褂孟铝蟹椒ń鉀Q:  (1)使用低流速;  (2)換大孔徑的過濾器;  (3)增加進液管道內徑;  (4)抬高或加壓儲液器;  (5)不用過濾器,但流動相**要先過濾;  (6)儲液器蓋子太緊,在儲液器內形成真空,打出的流動相不連續。應松開蓋子或留有1mm的縫隙;  (7)進液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液,注意調整進液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動、泵部件損壞等,都能引起供液不正常?! ?3、流動相和儲液器被污染  由于污染,噪音越來越大,檢測器基線上升。污染物可能被泵以穩定的濃度打入系統,而再以穩定的濃度流出來,所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時弱流動相可以使污染物聚在柱頂,流動相強度增加后污染物可能被洗脫出來一個大的偽峰。有時基線噪音突然增大或突然提高,都是因為反復加進新的流動相或系統用得太久(通宵)所造成的。新加進的流動相有污染物或者流動相長霉,繁殖了**?! ∨K的儲液器會污染清潔的流動相。每種流動相備有專用的儲液器,或者定期報廢儲液器?! ×鲃酉辔廴緛碜赃@幾個方面  04、試劑質量不高,玻璃器皿不合格;  微生物的影響;  配制流動相時操作不當等;  因此要求高純度化學試劑和HPLC級溶劑;  玻璃器皿按規定清洗干凈;  為防止微生物生長,每天要用甲醇清洗系統;  懷疑系統內生長了微生物,可用稀硝酸沖洗即可(注意不要損壞柱和管道系統);  真空脫氣時防止泵油帶入流動相;  用清潔的惰性塞子、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動相;  已經污染的流動相**要廢棄掉。

液相色譜常見符號與術語歸納 液相色譜使用方法(圖1)


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